馬特里病

1.病原概述 病原型別：原生生物(protest) 病原環境：海水 學名：Mikrocytos mackini 病名(及俗名)：Denman Island disease 或稱 Microcell disease of Pacific oyster. 最早發現者： ＯＩＥ狀況：表列(Listed) 病原摘要： Mikrocytos mackini 為一原生動物大小約2-4um，目前所知尚無其它strains (Farley 1988)，目前對於此病原於離開宿主後存活情形不祥，病原可經水而水平傳染。 人畜共通：No 病原分類 2.病原分類 目前已知Mikrocytos mackini 與其它 microcells 屬如 Bonamia 等無關( 如 B. ostreae, B. exitiosa, B. roughleyi and other Bonamia spp.) (Carnegie and Cochennec-Laureau 2004). 疾病特性： 疾病型態及流行病學：急性或慢性型態、器官傳播分佈情形 本病主要流行於北美西岸如加拿大西岸、美國華盛頓州等地區，當水溫低於10℃ 維持3-4個月後其發生率與致死率則常可達族群一半，顯然約有一半是具有抵抗性，Hervio 1996 研究指出要引發牡蠣感染本病須於10℃以下連續3月以上才會成立，本疾病之傳播不須任何煤介。 臨床症狀及病理學： 臨床上牡蠣通常於春天時後發生死亡，並可於其軟組織中發現直徑約5 mm 大小之黃綠色(yellow green)膿皰(pustules)，其殼上亦有棕色之疤(scar)，但發現感染死亡之牡蠣其它狀況仍良好(good condition)，但這些並非本病之特異病變。 病理學上病材可固定於Davidson’s solution 或中性福馬林(10% buffered formalin)。 病原(Microcells) 可於小囊結締組織細胞之細胞質(within the cytoplasm of cesicular connective tissue cells) 中發現，特別於膿皰(pustules)周圍之結締組織，同時亦有血細胞之浸潤 (haemocyte infiltration ) 及壞死之細胞 (Bower 2007) Mikrocytos mackini 直徑約2-4Mm 在病灶區除上述組織外亦會感染肌細胞(myocytes )及血球細胞(haemocytes)。 病原致病性意義：實際魚場及田間發病、抗藥性等情形 Mikrocytos mackini 可感染多種oysters(牡蠣)如 Crassostrea gigas (PaciWc Oysters) 、Crassostrea virginica (eastern oysters) 、Ostrea edulis (European Xat oysters) 及 Ostrea conchaphila (Olympia oysters)等(Bower et al 2005)，但有些 clam 如 Panope abrupta 則具有抵抗性。

組織壓片：以乾淨之刀片切病灶區(pustule) 直接壓至乾淨之玻片後並以Wright-Giemsa染色後以1000x 之油鏡直接觀查病原---此方法之特異性不高。 組織病理切片 分子生物學-PCR(Carnegie et al 2003) 選擇病牡蠣或剛死亡之檢體 DNA之抽取：可使用一般之kit 如 (e.g. DNeasy Kit; QIAGEN). 引子對分別為MIKROCYTOS-F (AGATGGTTAATGAGCCTCC) 及 MIKROCYTOS-R (GCGAGGTGCCACAAGGC).其所使用之反應條件分別為 94℃ 10分鐘，之後40 個循環分別為94℃ 1分、60.5℃ 分、72℃ 1分，最後72℃ 10 分。其產物大小為546bp。 in-situ hybridisation (ISH).原位雜交法：選擇膿皰(pustules)周圍組織 及內收肌(adductor mucles) 方法可參考Meyer 2005。

目前無疫苗、化學治療劑及免疫刺進劑可供使用(vaccination: none、 chemotherapy: none、immunostimulation : none)亦無發展出有效之抗病品種。因此可先行採收3年內(最好於第3年2月前)已達上市大小之牡蠣、在6月前不要與可能發病之牡蠣一起養殖。

Bower SM, Bate K, Meyer GR. Susceptibility of juvenile Crassostrea gigas and resistance of Panope abrupta to Mikrocytos mackini. J. Invertebr. Pathol., 88: 95-99, 2005. Bower SM, Carnegie RB, Goh B, Jones SRM, Lowe G.J, Mak MWS. Preferential PCR amplification of parasitic protistan small subunit rDNA from metazoan tissues. J. Eukaryotic Microbiol., 51: 325-332, 2004. Bower SM. Synopsis of Infectious Diseases and Parasites of Commercially Exploited Shellfish: Mikrocytos mackini (Denman Island Disease) of Oysters. 2007. Carnegie RB, Cochennec-Laureau N. Microcell parasites of oysters: recent insights and future trends. Aquatic Living Resources 17: 519-528, 2004. Carnegie RB, Meyer G.R, Blackbourn J, Cochennec-Laureau N, Berthe FCJ, Bower SM. Molecular detection of the oyster parasite Mikrocytos mackini and a preliminary phylogenetic analysis. Dis. Aquat. Org., 54: 219-227, 2003. Farley CA, Wolf PH, Elston RA. A long-term study of 'microcell' disease with a description of a new genus, Mikrocytos (g. n.), and two new species, Mikrocytos mackini (sp. n.) and Mikrocytos roughleyi (sp. n.). Fishery Bull., 86: 581-593,1988. Hervio D, Bower SM, Meyer GR. Detection, isolation and experimental transmission of Mikrocytos mackini, a microcell parasite of PaciWc oysters Crassostrea gigas (Thunberg). J. Invertebr. Pathol. 67: 72–79,1996. Meyer GR, Bower SM, Carnegie RB. Sensitivity of a digoxigenin-labelled DNA probe in detecting Mikrocytos mackini, causative agent of Denman Island disease (mikrocytosis) in oysters. J. Invertebr. Pathol. 88: 89-94, 2005.

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