六鞭毛蟲症

1.病原型別：原蟲（protozoa） 病原環境：海水、淡水（marine、freshwater） 學名： Spironucleus salmonis n. comb Poynton et al. 2004, （ Octomitus salmonis sensu Moore 1922, Davis 1926）、（ Hexamita salmonis sensu Ferguson 1979） 病名（及俗名）：六鞭毛蟲症（Hexamitosis）、於2004發表更改為旋核六鞭毛蟲症（Spironucleosis） 最早發現者：Moore et al.（1922） OIE狀況：未表列（Not Listed） 病原摘要： 具四對鞭毛，其中前鞭毛3對，後鞭毛1對，並形成軸桿。胞核1對，在蟲體前端呈八字排列，蟲體一般呈棃形、後端尖銳，無切口及胞口，軸桿的結構較複雜，由1對副原纖維的空管，其中包裹著後鞭毛，通過蟲體向後延伸，毛基體在胞核之前。後鞭毛沿著蟲體部份與胞質相連，成為軸桿。蟲體之滋養型態一般呈卵圓形，兩側對稱，背腹扁平。滋養體在宿主腸管內繁殖分裂，最後形成卵圓形包囊，包囊可在水中生活數天，最多7天。 人畜共通：No 2.病原分類 肉足鞭毛蟲門（Sarcomastigophora）、鞭毛蟲亞門（Mastigophorids）、動鞭毛蟲綱（Zoomastigophorea）、雙滴蟲目（Diplomonadida）、六前鞭毛蟲科（Hexamitidae）、旋核鞭毛蟲屬（Spironucleus） 命名沿革： Octomitus salmonis sensu Mooue. 1922, Davis, 1926, Hexamita salmonis sensu Ferguson, 1979, Spironucleus salmonis, Poynton et al. 2004, Fard et al., 2007. 疾病特性 旋核鞭毛蟲屬（Spironucleus）與六前鞭毛蟲屬（Hexamita）之形態區別，主要在細胞核的形狀（包括長度、前端之緊貼纏繞）、基體位置（kinetosomes），前中部位，呈現鞭毛囊（flagellar pocket），尤其是蟲體營養體（trophozoites）細胞質之呈貌及細胞骨架（cytoskeletal），從更改鮭六鞭毛蟲（ Hexamita salmonis）（Ferguson 1979）為鮭旋核六鞭毛蟲（ Spironucleus salmonis）（Poynton et al. 2004），蟲體主要寄生於鮭科魚類（如河鱒，brook trout， Savelinus fontinalis）腸道上皮細胞，有時亦會造成系統性疾病，而發現蟲體存在於腎、脾及肝實質組織之血管內。目前依文獻記載另有三種旋核六鞭毛蟲；1.感染大西洋鮭魚（Atlantic salmon, salmo salar L）、北極紅點鮭（Arctic char, Salvelinus alpinus）、河鮭（chinook satmon, Oncorhynchus tshawytscha）、鮰魚（grayling, Thymallus thymallus）之 Spironucleus barkhans（ Spironucleus salmonicida, R）。2.感染多種鮭科魚類及淡水養殖魚類（包括鯉科、慈鯛科）、淡水與海水觀賞魚類之扭轉旋核六鞭毛蟲（ Spironucleus vortens）。3.感染大西洋鱈魚（Atlantic cod, Gadus morhua L.）、haddock（ Melanogrammus aeglefinus L.）、burbot（ Lota lota, Gadidae）、saithe（ Pollachius virens L.）之突瘤旋核六鞭蟲（ Spironucleus torosa）。這三種旋核六鞭毛與鮭旋核六鞭毛蟲之區分，如僅用光學顯微鏡下之形態學鑑定很難區別，一般需應用掃描式及穿透式電子顯微鏡行細胞骨架之特徵描述區屬鑑定。鮭旋核六鞭毛蟲（ S. salmonis）依蟲體表裝飾物（surface ornamentation）及支稱之細胞骨架很容易區分 S. vortens及 S. torosa; S. salmonis缺乏體表裝飾物及支稱細胞骨架； S. torosa具tori（顯著圓形構造物，salient （raised）round structure）、 S. vortens含有體末端之複合側嵴（compound lateral ridges）。使用穿透式電子顯微鏡觀察蟲體橫切面，則鞭毛囊併含之微小管（microtubules）構造； S. salmonis含3個輻射狀微小管、 S. torosa含3個同心圓狀微小管、 S. vortens含3個錯開狀微小管。從蟲體細胞質呈貌之特徵，顯示 S. salmonis含有電子緻密體（electrondense bodies）、緻密性後囊游離於核醣體邊及碗形構造（bowl-shapped）而 S. vortens及 S.torosa則缺乏上述構造。而 S. salmonis與 S. barkhanus則不易區別，因為具有許多相似的特徵；這二種旋核六鞭蟲均具有3個輻射狀微小管併合後鞭毛構造，但仍含某些不顯著之差異1.複層基底開放聚合的位置2. 1個直接微小管束被取代3.每束微小管之數目。 S. salmonis在每輻射狀束最大微小管數目5.3.5； S. barkhanus則為3.2.6；同時此二蟲體之複層基底呈不對稱排列，且向後擴展呈腎形構造（kidney shapped）。這四種旋核六鞭毛蟲形態上之明細區別，可詳閱Poynton et al. 2004；Dis. Aquat. Org. 60：49-64發表之文獻記錄。 疾病型態及流行病學 目前依文獻記載寄生於魚類（包括養殖或野生）之六鞭毛蟲（包括旋核六鞭毛蟲約有30種，R）。一般認為寄生於魚類之旋核六鞭毛（ Spironucleus spp.）只有一個宿主，直接傳播。滋養體（trophozoites）在魚腸道中以縱二分裂之方式繁殖，亦可寄生於胃、幽門盲囊、肝、膽囊、血液和膀胱等，且可隨糞便排入水中，魚通過吞食滋養體，通過前，中到達後腸生長、繁殖；同時滋養體在魚腸道中能形成胞囊（cyst），也可經過胞囊進行傳播。Uzmann及Ayduk（1963, R）在厭氧條件下能培養獲得鮭六鞭毛蟲（鮭旋核六鞭毛蟲， H.＝ S. salmonis）；旋核六鞭毛蟲是導致許多北美、歐洲、亞洲鮭科魚類養殖場嚴重損失的重大病因之一；Fard等氏（2007）報告旋核六鞭毛蟲感染虹鱒（rainbow trout, Oncorhynchus mykiss）體長10至20公分最常寄生於幽門區，其中消化道PH值為6.8～7.9，平均值為7.3，同時認為旋核六鞭毛蟲在體內消化道最適生長之PH值為7.1～7.5。至近年來的推論，因為在正常養殖鮭科魚類腸道中，常能檢查出少許之鞭毛蟲；所以認為旋核六鞭毛蟲對魚類之侵害證據還不充足，一般皆認為無害或是魚體發病的誘因；據大陸學者汪建國在稻田和池塘養殖草魚之腸道中發現中華六鞭毛蟲（ Hexamita sinensis, 1956）的數量遠超過其他種類之原生動物，而且越到後腸其蟲體數量愈多，尤其是在成網狀未消化的殘渣物中數量更大；但對魚體卻無致病性；由此推論，可能符合凡是吃食植物為生的動物大多數具有許多原生動物在它們的消化道中，所以可能與消化植物纖維有關，可以進一步的推論，中華六鞭毛蟲生活於草魚腸道中似乎是屬於共生現象。 臨床症狀及病理學 依據文獻記載各種旋核六鞭毛蟲所引發的症狀大都類似，Moore氏認為鮭旋核六鞭毛蟲（ S. salmonis）是引發北美洲養殖鮭科魚類嚴重損失的病因，會導致罹病魚體食慾減退、身軀消瘦、魚頭變大。Davis則認為前述蟲體可侵入魚體腸道上皮細胞，進行分裂增殖，導致腸道上皮細胞壞死。Amlacher氏報導六鞭毛蟲寄生於養殖池塘中的一些魚類，如金魚、食蚊魚，能引發腸道及膀胱的連接外處，產生腫脹及腎小管萎縮、壞死。Molnar認為鞭毛蟲能使草魚、天使魚及水族箱中的其他魚類發病，除了寄生於魚類腸道外，在某些嚴重病例，尚能入侵罹病魚體血液、肝及膽囊，並引發這些器官發生病變。Ferguson氏通過藥物治療，能過殺死大量鮭旋核六鞭毛蟲，魚苗的死亡率則下降；因此，他推論在一定環境條件下，六鞭毛蟲的重要性不可低估。 突瘤旋核六鞭毛蟲（ S. torosa）能感染養殖鮭科魚類，如大西洋鱈魚（Atlantic cod, Gadus morhua）、haddock（ Melanogrammus aeglefinus. L.）、鱈魚類（gadoid）如：tusk、whiting及forubeard rockling；Poynton及Morrison等氏（1990）發現突瘤旋核六鞭毛蟲緊靠於腸道上皮細胞之微絨毛，並不入侵上皮細胞，推論此蟲體似乎能夠破壞微絨毛膜；藉此攝食宿主細胞之胞質，對微絨毛產生功能和結構的損害，間接影響魚體吸收養份的功能，並使罹病魚體消瘦、降低免疫能力或併發二次性感染。 另一旋核六鞭毛蟲（ S. barkhanus＝ S. salmonicida）能感染大西洋鮭魚（Atlantic salmon, Salmo salar）、鮰魚（grayling, Thymallus thymallus）、Arctic char（ Salvelinus alpinus）；此蟲體可生存於廣鹽性環境中，而蟲體適應水溫的能力強，可生長於5℃至20℃，據Sterud氏（1998, R）報導本蟲體似乎有很大的增殖能力，在每毫升107個蟲體之體外培養中，其增殖速度40倍於鮭旋核六鞭毛蟲，由這項體外培養數據的推論，本蟲體對幼大西洋鮭魚所造成的系統性感染，形成肌肉及內臟器官的膿潰病灶。同時Sterud（2003, R）亦報導及證實在某一環境條件下，能引發本蟲體感染養殖北極紅點鮭（arctic char）形成系統性感染，可發現蟲體於心臟、眼、肝、腎、脾、後腸及血液循環中，造成對這些器官的損傷而發生病變如心臟之心外膜增厚（因為結締組織增生及炎症細胞浸潤）、肝臟竇狀隙組織擴大、鬱血及水腫，前賢間質造血組織壞死、廣泛性脾髓組織壞死等病灶；同時證實此蟲之滋養體可行細胞內寄生。 病原致病性意義 本病原屬雙滴蟲目鞭毛蟲，可能由原始的Enteromonas自我複製、不完全分裂演化而來，並且Brugeroolle等氏（1974、1975、1979）假設雙滴目的進化途徑為：Trepomonas─Hexamita─Spironucleus─Octomitus─Giarda。六鞭毛蟲之蟲體兩個對稱核與兩條後鞭毛著生面成一定角度；不同種類、角度可能不一樣、角度的變化或許能夠反映六鞭毛蟲科內的種系進化趨勢（R），由電子顯微鏡行形態學觀察蟲體表桿狀體的存在否、體內是否見到粗糙型內質網，一般體表無桿狀體之蟲體、其體內含有豐富粗糙型內質網，並間接推論體表無桿狀體之蟲體合成蛋白多肽的功能旺盛，是否具蟲體分類之依據；同時依細胞骨架、微小管、細胞質呈貌等超顯微構造分類屬別，並由不同蟲體株SSU rRNA基因序列分析比較，致病株與非致病株間是否具某基因序列的變異或缺損，並發展出快速檢查、鑑別的方法，是目前在臨床診療上極需解決的問題。

一級初步診斷： 由罹病魚體之臨床症狀，如食慾減退、體色改變、行動遲緩及體形消瘦、頭型變大，引發卡它性腸炎等外表徵狀；將瀕死魚體經剖檢後，再行腸內容物（後腸）及刮取腸黏膜行壓片鏡檢，可觀察到具6條前鞭毛及2條後鞭毛，一般蟲體之滋養體（trophozoites）外形呈延長蟲體而體後端形成緊貼；具有2個香腸型輕度的旋核，位於蟲體鄰近頂部而在蟲體前端部位形成馬靴形複合物。蟲體最前端部有一馬靴形上核纖維的輪廓，二個對稱狹窄外形之胞口，延體蹤面靠近蟲體表面，並開口於體後側，且無明顯形成漏斗狀，從胞口處之尾部突出2條後鞭毛（recurrent flagella, RFI），而一般在正常魚體腸道內可觀察到少數鞭毛蟲；唯嚴重病例時，蟲體之滋養體（有時含多核蟲體）可在肝、腎、脾、心臟、膽囊、膀胱、血管及滲出液中檢出，依鏡下每視野檢出蟲體數的多寡來決定感染程度之輕重，可參表1。 二級初步診斷： 可將罹病魚體之腸內容物加入Keister’s medium（TYI-S-33 medium十膽鹽，1983, R）於10℃～15℃、PH值7.1下培養，並使用100～600倍視野鏡檢，其鏡檢物可用螢光核酸染色（fluorescent nucleic acid stain），其染料為4′-6-diamidino-2-phenyl-indole（DAPI），詳細方法可參閱Sterud E. 1998; Dis. Aquat. Org. 33：57-61.之文獻。 三級初步診斷：目前尚無可應用之方法。 一級確定診斷： 可依上述臨床症狀、組織病理病變特徵、蟲體鏡檢之形態學判別；同時可應用掃描式或穿透式電子顯微鏡分析蟲體細胞質呈貌、細胞骨架及微小管形態區別屬種別。可參閱Poynton et al. 2004; Dis. Aquat. Org. 60：49-64.文獻記載之描述蟲體區分的各種特徵。 二級確定診斷： 目前依蟲體SSU rRNA基因序列可區分感染養殖或野生Arctic charr（ Salvelinus alpinus）之 Spironucleus barkhanus具有2個基因型（genotypes）之區別；可參閱Jorgensen & Sterud氏於2004，發表於Dis. Aquat. Org. 62：93-96.之文獻記載。 三級確定診斷：目前尚無發展蟲體PCR及核酸探針的檢測判定方法。

目前使用藥物治療罹病魚群，特別是食用魚類限於行政院農業委會動植物防疫檢疫局頒布的水產動物用藥使用規範裏所登錄的藥物方可使用，間牽涉的藥物停留期，需確實執行，以避免傷害廣大的消費者之身體健康。

1.改善水質環境、減少魚體緊迫。 2六鞭毛的控制：可使用藥物治療，在觀賞魚類常用Metronidazole、3-10ppm、藥浴4天。 3.維持良好水質環境，避免大量換水或其它水質變化所造成的緊迫。 4.適宜的放養密度、用時避免大小魚體混養，因為幼魚較易受到六鞭毛侵襲。 5.注意營養均衡，尤其是維生素、鈣磷等礦物質補充，會增加魚體免疫力、提高抗病能力。 6.定期驅除腸道內的各種寄生蟲，減少因其他寄生蟲的問題誘發六鞭毛滋生。

1.吳英松、曾義善、汪建國‧寄生魚類的六鞭毛蟲超微結構及系統發育‧水生生物學報‧2003；27(2)：201-207. 2.Fard MR et al. Ultrastructure and molecular diagnosis of Spironucleus salmonis（Diplomonadida）from rainbow trout Oncorhynchus mykiss in Germany. Dis. Aquat. Org. 2007；75：37-50. 3.Fard MR, Weisheit C, Poynton SL. Intestinal PH profile in rainbow trout Oncorhynchus mykiss and microhabitat preference of the flagellate Spironucleus salmonis（Diplmonadida）. Dis. Aquat. Org. 2007；76：241-249. 4.Jorgensen A, Sterud E. SSU rRNA gene sequence reveals two genotypes of Spironucleus barkhanus（Diplomonadida）from farmed and wild Arctic char Salvelinus alpinus. Dis. Aquat. Org. 2004；62：93-96. 5.Poynton S, Morrison CM. Morphology of Diplomonad Flagellates: Spironucleus torosa N. Sp. from Atlantic Cod Gedus morhua., and Haddock Melanogrammus aeglefinus (L.) and Hexamita salmonis Moore from Brood Trout Salvelinus fontinalis. J. Eukaryot Microbiol. 2007；37(5)：369-383. 6.Poynton S, Fard MR et al. Ultrastructure of Spironucleus salmonis n. comb.（formerly Octomitus salmonis sensu Moore 1992, Davis 1926, and Hexamita salmonis sensu Ferguson 1979）, with a guide to Spironucleus species. Dis. Aquat. Org. 2004；60：49-64. 7.Sterud E, Poppe T, Borno G. Intracellular infection with Spironucleus barkhanus（Diplomonadida: Hexamitidae）in farmed Arctic char Salvelinus alpinus. Dis. Aquat. Org. 2003；56：155-161. 8.Sterud E. In vitro cultivation and temperature-dependent growth of two strains of Spironucleus barkhanus（Diplomonadida: Hexamitidae）from Atlantic salmon Salmo salar and grayling Thymallus thymallus. Dis. Aquat. Org. 1998；33：57-61. 9.Sterud E, Mo TA, Poppe T. Systemic spironucleosis in sea-farmed Atlantic salmon Salmo salar, caused by Spironucleus barkhanus transmitted from feral Arctic char Salvelinus alpinus? Dis. Aquat. Org. 1998；33：63-66. 10.Jorgensen A, Sterud E. Phylogeny of spironucleus（eopharyngia: diplomonadida: hexamitinae）. Protist. 2007；158(2)：247-254.

相關連結：